Οι φίλοι που κάνουν πειράματα που σχετίζονται με κύτταρα πρέπει συχνά να χρησιμοποιούν μεθόδους κατάψυξης κυττάρων. Εν ολίγοις, η αποθήκευση σε κατεψυγμένα κύτταρα είναι η εξοικονόμηση κυττάρων σε περιβάλλον χαμηλής θερμοκρασίας για να επιτευχθεί ο σκοπός της μακροπρόθεσμης διατήρησης. Τα κύτταρα θα έχουν έναν ορισμένο βαθμό μετάλλαξης κατά τη διαδικασία μετάδοσης. Προκειμένου να διασφαλιστεί ότι τα κύτταρα μπορούν ακόμα να χρησιμοποιηθούν σε περίπτωση κυτταρικής ρύπανσης και μετάλλαξης, ορισμένα κύτταρα χρησιμοποιούνται συνήθως για κατάψυξη.
Η αρχή της παγωμένης κυψέλης
Μια αρχή στη διαδικασία της κατάψυξης των κυττάρων και της ανάκτησης είναι η "αργή παγωμένη σύντηξη" για να εξοικονομηθεί η ζωτικότητα των κυττάρων στο μέγιστο. Με απλά λόγια, πρέπει να είναι αργό όταν παγώνει και ψύχεται και πρέπει να θερμαίνεται γρήγορα όταν ανακτάται από χαμηλή θερμοκρασία. Ο λόγος για την αργή κατάψυξη είναι ότι εάν τα κύτταρα τοποθετηθούν απευθείας σε περιβάλλον εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας όπως το υγρό άζωτο, τα κύτταρα σχηματίζουν έναν μεγάλο κρύσταλλο πάγου, ο οποίος θα βλάψει τα κύτταρα.
Εάν το καταψύξετε αργά, τα κύτταρα μπορούν να αφυδατωθούν αργά για να επιτευχθεί ο σκοπός της προστασίας των κυττάρων. Επιπλέον, κατά την ανάκτηση, είναι επίσης για να αποτρέψουμε τους μικρούς κρυστάλλους πάγου να σχηματίσουν μεγάλους κρυστάλλους πάγου, δηλαδή τους βαρείς κρυστάλλους των κρυστάλλων πάγου. Επομένως, όταν όλοι συνήθως κάνουν κυτταρική κατάψυξη, αυτό προκαλεί πάντα απώλειες στα κύτταρα, κάτι που είναι πιθανό να έχει αντίκτυπο στο στάδιο της κατάψυξης.
Διάφορες μέθοδοι κατάψυξης κυττάρων
Χειροκίνητη μέθοδος: Τα κατεψυγμένα κύτταρα συνήθως αποθηκεύονται σε υγρό άζωτο. Η μέθοδος χειροκίνητης λειτουργίας είναι η ψύξη του ντεγκραντέ στο ψυγείο. Φυλάξτε τα κελιά στον κατεψυγμένο σωλήνα αποθήκευσης και τοποθετήστε τα σε περιβάλλον ψυγείου 4 βαθμών C, -20 βαθμών C, -80 βαθμών C με τη σειρά. Καταψύχεται για 24 ώρες στους -80 βαθμούς C πριν μεταφερθεί σε υγρό άζωτο. Η χειροκίνητη ψύξη δεν απαιτεί πρόσθετα συμπληρώματα άλλων αναλώσιμων. Μπορεί να λειτουργήσει χειροκίνητα. Είναι το πιο απλό, αλλά δεν είναι απλό. Η πραγματική λειτουργία είναι ενοχλητική. Και το αποτέλεσμα δεν είναι πολύ καλό, επειδή αυτή η μέθοδος ψύξης δεν είναι ακόμα ομοιόμορφη και δεν είναι απαραίτητα εφαρμόσιμη για πιο εύθραυστα κύτταρα.
Κιβώτιο ψύξης βαθμίδας : Το κιβώτιο ψύξης βαθμίδας που πωλείται στην αγορά χρησιμοποιείται ειδικά για την ομοιόμορφη ψύξη της διαδικασίας κατάψυξης. Η ταχύτητα ψύξης είναι συνήθως -1 βαθμός /λεπτό. Τοποθετήστε τον κατεψυγμένο σωλήνα αποθήκευσης στο κουτί ψύξης ντεγκραντέ και τοποθετήστε το κουτί ψύξης βαθμίδας απευθείας στο περιβάλλον ψυγείου -80 βαθμού C για να περάσετε τη νύχτα χωρίς χειροκίνητη λειτουργία ντεγκραντέ. Κατόπιν χαμηλώστε τον σωλήνα αποθέματος και βάλτε τον σε υγρό άζωτο. Το αποτέλεσμα της χρήσης κουτιών ψύξης με κλίση είναι καλύτερο, επειδή τα εμπορικά κουτιά ψύξης στην αγορά μπορούν να εξασφαλίσουν περίπου ομοιόμορφο ρυθμό ψύξης.
Υπάρχουν δύο κοινά κουτιά ψύξης με κλίση στην αγορά. Ανάγκη προσθήκης ισοπροπυλίου, συνήθως σώμα κουτιού υπολογιστή. Κατά τη χρήση, προσθέτοντας ισοπενόλη στη γραμμή κλιμάκωσης στο κουτί κατά τη χρήση. Η ισοπροπανόλη χρησιμοποιείται ως φορέας για αποθήκευση και διανομή θερμότητας.
Ένα άλλο είδος δεν χρειάζεται να προστεθεί με ισοπροπύλιο, αφρισμός και ο καταψύκτης μπορεί να τοποθετηθεί απευθείας κατά τη χρήση, κάτι που είναι πιο βολικό στη λειτουργία.
Το κουτί ψύξης της ισοπροπανόλης συνιστάται για αντικατάσταση του υγρού μετά από πολλές φορές χρήση, αλλά επειδή η ισοπροπανόλη είναι ένα επιβλαβές υγρό, το οποίο βλάπτει τα πειράματα και το περιβάλλον, μπορεί συνήθως να χρησιμοποιηθεί αρκετές φορές. Ωστόσο, είναι απαραίτητο να διασφαλιστεί ότι το υγρό είναι σε μια ορισμένη ποσότητα.
Μη προγραμματισμένη κατεψυγμένη αποθήκευση: Χρησιμοποιήστε μη προγραμματισμένα κατεψυγμένα υγρά που μπορείτε να αγοράσετε στην αγορά. Σε σύγκριση με το παραδοσιακό κατεψυγμένο υγρό, το εσωτερικό εξάρτημα μπορεί να μειώσει τη ζημιά στα κύτταρα του κρυστάλλου πάγου, έτσι ώστε να μην χρειάζεται να χρησιμοποιηθεί το ντεγκραντέ για να κρυώσει, ούτε να απαιτείται το κιβώτιο ψύξης με κλίση. Η κατεψυγμένη αποθήκευση μπορεί να τοποθετηθεί απευθείας σε περιβάλλον ψυγείου -80 βαθμού C.
Πολλά δείγματα κυττάρων είναι πολύ πολύτιμα. Εκτός από εμάς, πρέπει να το χρησιμοποιούμε όταν κάνουμε πειράματα. Πρέπει επίσης να επιλέξετε καλά προϊόντα όσο το δυνατόν περισσότερο σε σχετική επιλογή προϊόντων. Επιλέξτε τον κατεψυγμένο σωλήνα αποθήκευσης με κατάλληλη ποιότητα, δοκιμάστε να χρησιμοποιήσετε το εργαλείο ψύξης βαθμίδωσης για κατάψυξη και μεγιστοποιήστε την εγγύηση χαμηλής ζημιάς στα κύτταρα για να αποφύγετε μικρές απώλειες λόγω ασήμαντων.