Οι μικροβιακές γνώσεις που θέλετε
Οι μικροοργανισμοί είναι μια ομάδα μικροσκοπικών οργανισμών που υπάρχουν ευρέως στη φύση και είναι αόρατοι με γυμνό μάτι και πρέπει να μεγεθύνονται εκατοντάδες, χιλιάδες ή και δεκάδες χιλιάδες φορές με τη βοήθεια ενός οπτικού μικροσκοπίου ή ενός ηλεκτρονικού μικροσκοπίου. Έχουν τα πλεονεκτήματα του μικρού μεγέθους, της απλής δομής, της γρήγορης αναπαραγωγής, της εύκολης παραλλαγής και της ισχυρής ικανότητας προσαρμογής στο περιβάλλον.
Ταξινόμηση μικροοργανισμών:
Υπάρχουν πολλά είδη μικροοργανισμών, τουλάχιστον περισσότερα από 100,000 είδη. Σύμφωνα με τη δομή τους, τη χημική σύσταση και τις συνήθειες ζωής και άλλες διαφορές μπορούν να χωριστούν σε τρεις κατηγορίες.
Ο πυρήνας των ευκαρυωτικών μικροβιακών κυττάρων έχει υψηλότερο βαθμό διαφοροποίησης, συμπεριλαμβανομένων της πυρηνικής μεμβράνης, του πυρήνα και των χρωμοσωμάτων. Το κυτταρόπλασμα έχει πλήρη οργανίδια (όπως ενδοπλασματικό δίκτυο, ριβόσωμα και μιτοχόνδρια κ.λπ.). Οι μύκητες ανήκουν σε αυτό το είδος μικροοργανισμών.
Τα προκαρυωτικά μικροβιακά κύτταρα έχουν χαμηλό βαθμό πυρηνικής διαφοροποίησης, μόνο πρωτόγονο νουκλεόπλασμα, χωρίς πυρηνική μεμβράνη και πυρήνα. τα οργανίδια δεν είναι πολύ πλήρη. Υπάρχουν πολλά είδη τέτοιων μικροοργανισμών, όπως βακτήρια, σπειροχαίτες, μυκόπλασμα, ρικέτσια, χλαμύδια και ακτινομύκητες.
Οι ακυτταρικοί μικροοργανισμοί δεν έχουν τυπική κυτταρική δομή και κανένα σύστημα ενζύμων για την παραγωγή ενέργειας και μπορούν να αναπτυχθούν και να αναπαραχθούν μόνο σε ζωντανά κύτταρα. Οι ιοί ανήκουν σε αυτό το είδος μικροοργανισμών.
Διαχωρισμός και καθαρισμός μικροοργανισμών
Μια μικροβιακή καλλιέργεια που περιέχει περισσότερα από ένα είδη ονομάζεται μικτή καλλιέργεια. Εάν όλα τα κύτταρα σε μια αποικία προέρχονται από ένα γονικό κύτταρο, τότε η αποικία ονομάζεται καθαρή καλλιέργεια. Κατά την αναγνώριση βακτηριακών ειδών, οι μικροοργανισμοί που χρησιμοποιούνται γενικά απαιτείται να είναι καθαρές καλλιέργειες. Η διαδικασία λήψης καθαρής καλλιέργειας ονομάζεται διαχωρισμός και καθαρισμός και υπάρχουν πολλές μέθοδοι.
1. Μέθοδος πλάκας χύσεως
Αρχικά, το μικροβιακό εναιώρημα αραιώνεται σε σειρά και μια ορισμένη ποσότητα της αραίωσης αναμειγνύεται πλήρως με το διαλυμένο θρεπτικό μέσο άγαρ που διατηρείται σε περίπου 40-50 βαθμό και στη συνέχεια το μείγμα χύνεται σε ένα αποστειρωμένο τρυβλίο Petri. Μετά τη στερεοποίηση, η πλάκα επωάστηκε ανάποδα σε σταθερό θάλαμο. Ένα μόνο κύτταρο πολλαπλασιάζεται για να σχηματιστεί μια αποικία, μια μεμονωμένη αποικία λαμβάνεται για να γίνει ένα εναιώρημα και τα παραπάνω βήματα επαναλαμβάνονται αρκετές φορές για να ληφθεί μια καθαρή καλλιέργεια.
2. Μέθοδος επίστρωσης επίπεδης πλάκας
Αρχικά, το μικροβιακό εναιώρημα αραιώνεται κατάλληλα και μια ορισμένη ποσότητα της αραίωσης τοποθετείται σε μια στείρα πλάκα θρεπτικού άγαρ που έχει στερεοποιηθεί, και στη συνέχεια η αραίωση απλώνεται ομοιόμορφα στην επιφάνεια του μέσου με μια αποστειρωμένη γυάλινη σπάτουλα. Μία μόνο αποικία μπορεί να ληφθεί με επώαση σε σταθερή θερμοκρασία.
3. Μέθοδος χάραξης πλακών
Ο ευκολότερος τρόπος απομόνωσης μικροοργανισμών είναι η ραβδώσεις. Απλώστε μια μικρή ποσότητα της καλλιέργειας στο πιάτο χρησιμοποιώντας έναν αποστειρωμένο βρόχο. Υπάρχουν πολλές μέθοδοι γραφής. Οι συνήθεις μέθοδοι γραφής που είναι πιο πιθανό να εμφανιστούν σε μία αποικία είναι η μέθοδος κάθετου, η μέθοδος καμπύλης, η μέθοδος τετραγώνου, η μέθοδος ακτινοβολίας και η μέθοδος τεσσάρων δικτύων. Όταν ο βρόχος ενοφθαλμισμού κινείται προς τα πίσω στην επιφάνεια του μέσου, το βακτηριακό υγρό στον βρόχο ενοφθαλμισμού αραιώνεται σταδιακά και τελικά ένα μεμονωμένο κύτταρο διασκορπίζεται στη σχεδιασμένη γραμμή. Μετά την καλλιέργεια, κάθε κύτταρο αναπτύσσεται σε μια αποικία.
4. Μέθοδος καλλιέργειας εμπλουτισμού
Η μέθοδος και η αρχή της μεθόδου καλλιέργειας εμπλουτισμού είναι πολύ απλές. Μπορούμε να δημιουργήσουμε συνθήκες που επιτρέπουν μόνο στα επιθυμητά μικρόβια να αναπτυχθούν και κάτω από αυτές τις συνθήκες τα επιθυμητά μικρόβια μπορούν να ανταγωνιστούν αποτελεσματικά τα άλλα μικρόβια και να ξεπεράσουν κατά πολύ άλλα μικρόβια όσον αφορά την ικανότητα ανάπτυξης. Εάν πρόκειται να απομονωθούν ορισμένα υποχρεωτικά παράσιτα, τα δείγματα πρέπει να ενοφθαλμιστούν στους αντίστοιχους ευαίσθητους πληθυσμούς κυττάρων-ξενιστών για να αναπτυχθούν σε μεγάλους αριθμούς. Τα καθαρά παρασιτικά βακτήρια μπορούν να ληφθούν με επαναλαμβανόμενη σπορά.
5. Αναερόβια μέθοδος
Στο εργαστήριο, προκειμένου να απομονωθούν ορισμένα αναερόβια βακτήρια, ένας δοκιμαστικός σωλήνας που περιέχει το αρχικό μέσο μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δοχείο καλλιέργειας και ο δοκιμαστικός σωλήνας μπορεί να θερμανθεί σε βραστό λουτρό νερού για αρκετά λεπτά για να αποβληθεί το διαλυμένο οξυγόνο στο μέσο . Στη συνέχεια ψύχεται ταχέως και ενοφθαλμίζεται. Μετά τον εμβολιασμό, προστέθηκε στείρα παραφίνη στην επιφάνεια του μέσου για να απομονωθεί το μέσο από τον αέρα. Μια άλλη μέθοδος είναι να αντικαταστήσετε το αέριο στο μέσο με N2 ή CO2 μετά τον ενοφθαλμισμό και στη συνέχεια να σφραγίσετε το στόμιο του δοκιμαστικού σωλήνα πάνω από μια φλόγα. Μερικές φορές, προκειμένου να απομονωθούν ορισμένα αναερόβια βακτήρια πιο αποτελεσματικά, το απομονωμένο δείγμα μπορεί να ενοφθαλμιστεί στο μέσο και στη συνέχεια το τρυβλίο Petri μπορεί να τοποθετηθεί σε μια πλήρως σφραγισμένη συσκευή αναερόβιας καλλιέργειας.
6. Μέθοδος απομόνωσης ενός κυττάρου (ή ενός σπορίου).
Είναι η χρησιμοποίηση μεθόδου μικροδιαχωρισμού για την απευθείας απομόνωση μεμονωμένων κυττάρων ή μεμονωμένων ατόμων από μεικτούς πληθυσμούς για καλλιέργεια ώστε να ληφθεί καθαρή καλλιέργεια. Για μεγαλύτερους μικροοργανισμούς, ένα μεμονωμένο άτομο μπορεί να εξαχθεί χρησιμοποιώντας ένα τριχοειδές. Για μικροοργανισμούς με σχετικά μικρά άτομα, απαιτείται ένας μικροχειριστής για να πάρει μεμονωμένα μικροβιακά κύτταρα ή σπόρια με τριχοειδές ή μικροβελόνα, άγκιστρο, βρόχο κ.λπ. κάτω από το μικροσκόπιο για να ληφθεί καθαρή καλλιέργεια. Η μέθοδος διαχωρισμού ενός κυττάρου έχει σχετικά υψηλές απαιτήσεις στην τεχνολογία λειτουργίας.
Μικροβιακή καλλιέργεια
1. Ανάλογα με το αν χρειάζεται οξυγόνο κατά την καλλιέργεια, μπορεί να χωριστεί σε δύο κατηγορίες: αερόβια καλλιέργεια και αναερόβια καλλιέργεια.
Αερόβια κουλτούρα: γνωστή και ως «αερόβια κουλτούρα». Δηλαδή όταν καλλιεργείται αυτός ο μικροοργανισμός χρειάζεται οξυγόνο για να προστεθεί, αλλιώς δεν θα αναπτυχθεί καλά. Στο εργαστήριο, οι λοξές καλλιέργειες λαμβάνονται με τη λήψη αποστειρωμένου αέρα από το εξωτερικό μέσω βαμβακερών βυσμάτων. Το μεγαλύτερο μέρος της υγρής καλλιέργειας στη φιάλη Erlenmeyer ανακινείται με αναδευτήρα, έτσι ώστε ο εξωτερικός αέρας να μπορεί να εισέρχεται συνεχώς στη φιάλη.
Αναερόβια καλλιέργεια: Γνωστή και ως «αναερόβια καλλιέργεια». Τέτοιοι μικροοργανισμοί δεν απαιτούν οξυγόνο για να συμμετέχουν στην καλλιέργεια. Στη διαδικασία καλλιέργειας αναερόβιων μικροοργανισμών, το πιο σημαντικό σημείο είναι η απομάκρυνση του οξυγόνου στο μέσο.
2. Σύμφωνα με τη φυσική κατάσταση του μέσου, μπορεί να χωριστεί σε δύο κατηγορίες: στερεή καλλιέργεια και υγρή καλλιέργεια.
Στερεή καλλιέργεια: Είναι μια μέθοδος εμβολιασμού των στελεχών σε χαλαρό και πλούσιο σε θρεπτικά συστατικά στερεό μέσο και καλλιέργειας μικροοργανισμών υπό κατάλληλες συνθήκες.
Υγρή καλλιέργεια: Σε πειράματα, η υγρή καλλιέργεια μπορεί να κάνει τους μικροοργανισμούς να πολλαπλασιαστούν γρήγορα και να λάβουν μεγάλο αριθμό καλλιεργειών. Υπό ορισμένες προϋποθέσεις, είναι επίσης μια αποτελεσματική μέθοδος επιλογής και εμπλουτισμού βακτηρίων από μικροοργανισμούς.
Η BKMAM biotech παρέχει αντίστοιχα εργαστηριακά αναλώσιμα για μικροβιακή καλλιέργεια:
Πλαστικά πιάτα μιας χρήσης, στρογγυλά/τετράγωνα πιάτα Petri:
l Υλικό πολυστυρενίου υψηλής διαφάνειας (PS);
lΗ επιφάνεια είναι λεία και επίπεδη και δεν υπάρχει οπτική παραμόρφωση των κυττάρων υπό παρατήρηση με μικροσκόπιο.
l Ο σχεδιασμός στοίβαξης διευκολύνει τη στοίβαξη και την αποθήκευση.
l Αποστείρωση οξειδίου του αιθυλενίου (EO);
l Αντοχή στη φθορά και τη διάβρωση.
Πλαστικό ραβδί/θηλιά εμβολιασμού μιας χρήσης:
Υλικό πολυστυρενίου (PS);
Χωρίς ρύπανση, ενδοτοξίνες, DNase, RNase και πυρετογόνα.
Η ανεξάρτητη συσκευασία έχει αποστειρωθεί.
Καλή κατασκευή και πλήρεις προδιαγραφές.
Διανομέας πλαστικών κυττάρων μίας χρήσης, διανομέας βακτηρίων:
Υλικό πολυστυρενίου (PS);
Χωρίς ρύπανση, ενδοτοξίνες, DNase, RNase και πυρετογόνα.
Σχέδιο σε σχήμα L, εύκολο στη χρήση.
Μίας χρήσης, ελαφρύ και βολικό.
Πλάκες προδιαγραφών από ανοξείδωτο χάλυβα / αποστειρωμένες μίας χρήσης:
Η πλάκα προδιαγραφών από ανοξείδωτο χάλυβα είναι κατασκευασμένη από ανοξείδωτο χάλυβα και η πινακίδα προδιαγραφών μιας χρήσης είναι κατασκευασμένη από πολυπροπυλένιο ποιότητας τροφίμων (PP).
Χωρίς ρύπανση, ενδοτοξίνες, DNase, RNase και πυρετογόνα.
Η περιοχή επάλειψης είναι αυστηρά τυποποιημένη
Η μία πλευρά της πινακίδας προδιαγραφών είναι εξοπλισμένη με λαβή, η οποία είναι εύκολη στη χρήση
Αποστειρωμένη σφραγισμένη μονή συσκευασία για αποφυγή δευτερογενούς μόλυνσης της δειγματοληψίας και σφάλματος στα αποτελέσματα
Εφάπαξ χρήση για την αποφυγή διασταυρούμενης μόλυνσης και τη μείωση του φόρτου εργασίας
Καλώς ήρθατε να συνεργαστείτε μαζί μας
με εκτιμιση
Μάικλ Πενγκ
michael@bkmbio.com
